你分離的血清/血漿外泌體真的干凈嗎？對(duì)于血清和血漿等復(fù)雜樣本，分離外泌體是十分棘手的。主要原因是血液樣本的成分比較復(fù)雜，很容易造成細(xì)胞外囊泡的污染。脂蛋白顆粒就是常見(jiàn)細(xì)胞外囊泡難以分離的污染物之一。外泌體與脂蛋白的體積、密度十分相近，以至于很多傳統(tǒng)的方法都不能把他們完全分離。1.密度梯度超速離心高密度脂蛋白的密度與細(xì)胞外囊泡密度相近，所以它是密度梯度離心主要的污染脂蛋白。低密度脂蛋白雖密度低于EV，但離心的方法還不足以完全將二者分開(kāi)。因此使用密度梯度超速離心的方式可能無(wú)法完全排除脂蛋白污染的可能性。2.分子排阻法（SEC）SEC是根據(jù)粒徑大小進(jìn)行外泌體分離。脂蛋白與外泌體尺寸相近，尤其是極低密度脂蛋白與乳糜微粒。因此，也無(wú)法通過(guò)分子排阻法將脂蛋白與細(xì)胞外囊泡完全分離。3.超速離心法在粒徑和密度相差不大的情況下，顆粒的沉降速度也相差不大。尤其是脂蛋白顆粒數(shù)遠(yuǎn)超于外泌體時(shí)，被稱為金標(biāo)準(zhǔn)的超離法也稍顯不足了?；诖?，維思克思推薦選擇磁珠法（WSR0002-2），是基于自主研發(fā)的均相液體磁珠，可特異性捕獲外泌體而不吸附雜質(zhì)，實(shí)現(xiàn)高純度外泌體分離。外泌體研究工具小批量試用裝供應(yīng)，適合前期方法學(xué)驗(yàn)證，降低試錯(cuò)成本。工程化外泌體廠家直銷

大體積外泌體樣本量分離方法總結(jié)大體積外泌體樣本在濃縮后根據(jù)不同應(yīng)用，需銜接不同的外泌體分離方法。維思克思總結(jié)出現(xiàn)在常用、簡(jiǎn)便、效果比較好的三種方法。SEC重力柱是基于分子排阻色譜原理，根據(jù)被分離組分分子大小差異進(jìn)行外泌體的分離。具有操作簡(jiǎn)便、高純度和高回收率等優(yōu)點(diǎn)，特別適用于大體積樣本中的外泌體分離。分離的外泌體可用于WB分析、NTA或納米流式粒徑分析、電鏡檢測(cè)、組學(xué)研究、細(xì)胞和動(dòng)物功能研究等。（WSR0003）SEC離心柱是離心柱式的外泌體分離產(chǎn)品，離心柱中裝填的介質(zhì)能無(wú)差別的吸附雜質(zhì)而不結(jié)合外泌體，實(shí)現(xiàn)超快速、高收率的外泌體分離。分離的外泌體可用于WB分析、NTA或納米流式粒徑分析、電鏡檢測(cè)、組學(xué)研究、細(xì)胞和動(dòng)物功能研究等。（WSP0016）磁珠法外泌體分離試劑盒基于自主研發(fā)的均相液體磁珠，能特異性捕獲外泌體，實(shí)現(xiàn)高純度、高回收率外泌體分離。具有操作簡(jiǎn)便、高純度和高回收率等優(yōu)點(diǎn)，特別適用于血漿、血清等復(fù)雜樣本中的外泌體分離。分離的外泌體可用于WB分析、NTA或納米流式粒徑分析、電鏡檢測(cè)、組學(xué)研究、細(xì)胞和動(dòng)物功能研究等。（WSR0002-2）工程化外泌體廠家直銷外泌體研究工具濃縮型試劑配方，同等實(shí)驗(yàn)需求用量更少，降低長(zhǎng)期使用成本。

外泌體研究常見(jiàn)問(wèn)題解答51.外泌體樣品如何保存？長(zhǎng)期保存，置于-80℃。凍存前，離心去除細(xì)胞和細(xì)胞碎片，再將樣品分裝保存在-80℃。如果條件允許，建議用新鮮樣品進(jìn)行外泌體的分離和后續(xù)實(shí)驗(yàn)。短期保存（1-2天），置于4℃（確保無(wú)菌）。2.分離的外泌體如何保存？（1）使用低吸附離心管或凍存管，減少外泌體粘附。（2）對(duì)于短期而言，外泌體可以在4°C下儲(chǔ)存長(zhǎng)達(dá)1周。對(duì)于長(zhǎng)期儲(chǔ)存，外泌體可以在-20°C或-80°C下儲(chǔ)存。當(dāng)長(zhǎng)期儲(chǔ)存外泌體時(shí)，重要的是要考慮它們是否需要多次解凍。如果需要多次應(yīng)用（因此需要多次解凍）進(jìn)行分析，我們建議將外泌體懸浮液等分到多個(gè)試管中，以便每個(gè)試管只經(jīng)歷一個(gè)冷凍/解凍循環(huán)。多次凍融循環(huán)會(huì)對(duì)外泌體造成損傷并減少其數(shù)量。

需離心三次，這么方便的外泌體分離試劑盒你見(jiàn)過(guò)嗎？為方便各位老師使用我司試劑盒，我司將持續(xù)更新各個(gè)試劑盒使用教程視頻，請(qǐng)各位持續(xù)關(guān)注哦！維思克思的外泌體分離產(chǎn)品-SEC離心柱法外泌體分離試劑盒，只需要3次低速離心即可實(shí)現(xiàn)外泌體的高效分離，你見(jiàn)過(guò)嗎？詳情可聯(lián)系客服。產(chǎn)品信息：SpinColumnExosomeIsolationKit（WSR0015）；ExoIsoSpinColumn（WSP0015）；ExoIsoSpinColumnPlus（WSP0016）。維思克思生物科技(武漢)有限公司外泌體研究工具自動(dòng)化數(shù)據(jù)分析兼容，適配主流軟件，提升分析效率。

外泌體作為近幾年的“科研新貴”，可謂是紅極一時(shí)。由于它們具有獨(dú)特的遷移、靶向和選擇性內(nèi)化進(jìn)入特定細(xì)胞的能力，是非常有前途的遞送載體。然而，目前在外泌體研究和應(yīng)用上還存在以下痛點(diǎn)：痛點(diǎn)一：由于目前對(duì)這些內(nèi)源性囊泡了解還不夠深入，尤其是在體內(nèi)行為方面上，將外泌體治zhi療轉(zhuǎn)診至臨床故而仍為一大難點(diǎn)。體內(nèi)追蹤外泌體可以提供有關(guān)其生物分布、遷移能力、毒性、生物學(xué)的重要知識(shí)角色，溝通能力和行動(dòng)機(jī)制。痛點(diǎn)二：目前對(duì)于胞外囊泡的標(biāo)記方法有很多種，包括親脂性的染料(如PKH系列、Dil系列)，然而這些染料標(biāo)記方法存在一些不足。維思克思的示蹤探針基于兩項(xiàng)發(fā)明**，對(duì)比其他染色方法，該探針具有低背景、高效率、強(qiáng)耐酸的優(yōu)勢(shì)！發(fā)明名稱：1.一種pH敏感型探針?lè)肿蛹捌鋺?yīng)用；2.一種探針?lè)肿拥暮铣煞椒?。WSR0001-2工作原理為共價(jià)方式嵌入外泌體膜結(jié)構(gòu)。當(dāng)染料結(jié)合外泌體膜后，可通過(guò)熒光顯微鏡準(zhǔn)確觀察到外泌體在細(xì)胞內(nèi)運(yùn)動(dòng)與行蹤。突出優(yōu)勢(shì)：特異性高，無(wú)背景干擾；標(biāo)記效率高，該探針以共價(jià)的方式嵌入胞外囊泡的雙層膜結(jié)構(gòu)，優(yōu)于親脂性染料，避免自組裝形成的納米粒子造成信號(hào)干擾。在低pH（酸性）條件下也可顯色。外泌體研究工具快速?gòu)?fù)溶設(shè)計(jì)，減少實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備時(shí)間，提升操作便捷性。諾獎(jiǎng)Exosome實(shí)力廠家

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外泌體表征與定量難在什么地方？又該怎么做？我們拜訪過(guò)很多外泌體研究工作者，其中談到多的是外泌體難以分離，分離后的外泌體不好定量，定量的外泌體數(shù)據(jù)是否準(zhǔn)確等問(wèn)題。2.單一表征方法的局限性對(duì)外泌體的純度表征目前采用的是外泌體陰性蛋白標(biāo)志、顆粒蛋白比。外泌體陰性蛋白標(biāo)志一般采用WB檢測(cè)，屬于定性檢測(cè)，與樣本處理、抗體、顯色、曝光時(shí)間等多個(gè)因素有關(guān)，如果作為純度表征的指標(biāo)，顯然是不合適的。在蛋白聚集體或其他雜質(zhì)（糖/脂質(zhì)/核酸等）聚集體/大顆粒較多時(shí)，顆粒蛋白比的數(shù)值也可能較大，其作為純度表征指標(biāo)也有其局限性。既然上述外泌體定量方法、表征方法具有其局限性，那么如何科學(xué)的對(duì)外泌體進(jìn)行定量和表征呢？工程化外泌體廠家直銷

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