外泌體研究常見問題解答51.外泌體樣品如何保存？長(zhǎng)期保存，置于-80℃。凍存前，離心去除細(xì)胞和細(xì)胞碎片，再將樣品分裝保存在-80℃。如果條件允許，建議用新鮮樣品進(jìn)行外泌體的分離和后續(xù)實(shí)驗(yàn)。短期保存（1-2天），置于4℃（確保無菌）。2.分離的外泌體如何保存？（1）使用低吸附離心管或凍存管，減少外泌體粘附。（2）對(duì)于短期而言，外泌體可以在4°C下儲(chǔ)存長(zhǎng)達(dá)1周。對(duì)于長(zhǎng)期儲(chǔ)存，外泌體可以在-20°C或-80°C下儲(chǔ)存。當(dāng)長(zhǎng)期儲(chǔ)存外泌體時(shí)，重要的是要考慮它們是否需要多次解凍。如果需要多次應(yīng)用（因此需要多次解凍）進(jìn)行分析，我們建議將外泌體懸浮液等分到多個(gè)試管中，以便每個(gè)試管只經(jīng)歷一個(gè)冷凍/解凍循環(huán)。多次凍融循環(huán)會(huì)對(duì)外泌體造成損傷并減少其數(shù)量。外泌體研究工具濃縮型試劑配方，同等實(shí)驗(yàn)需求用量更少，降低長(zhǎng)期使用成本。檸檬EVs細(xì)胞實(shí)驗(yàn)

你真的知道如何正確收集和保存EVs嗎？樣本的收集和保存是導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果不確定性的一個(gè)重要來源。維思克思長(zhǎng)期研究以及不斷試錯(cuò)得出的“EVs樣本收集和保存”經(jīng)驗(yàn)，分享給各位外泌體研究者。血液。血液采集優(yōu)先隔夜空腹。血漿通常是EVs的優(yōu)先來源，因?yàn)樵谥苽溲鍟r(shí)凝塊形成期間會(huì)釋放額外的EVs。目前，血清的主要應(yīng)用是研究miRNA。要制備血漿，血液需要抗凝。細(xì)胞培養(yǎng)上清分離EVs。污染EVs和可檢測(cè)到的非EV組分的主要來源是培養(yǎng)基中的血清。如果細(xì)胞不能在無血清培養(yǎng)基中生長(zhǎng)，獲取的EVs將不再純凈，后續(xù)研究結(jié)果也將不準(zhǔn)確。建議超速離心從血清中去除EVs或購(gòu)買不含EV血清（WSC0020）；培養(yǎng)中監(jiān)測(cè)細(xì)胞活率，確保大于90%，否則會(huì)釋放凋亡小體和細(xì)胞碎片等其他囊泡，影響實(shí)驗(yàn)。WSR0020-3采用獨(dú)特配方，可減少EVs的損耗；在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中，無蛋白配方可明顯降低毒性反應(yīng)。凍存保護(hù)劑選型若需要進(jìn)行凍干處理，選擇WSR0020-3（凍干兼容）；若用于動(dòng)物注射實(shí)驗(yàn)，選擇WSR0020-3（無蛋白配方，低內(nèi)）；若-80℃短期保存，選擇WSR0020（經(jīng)典款，性價(jià)比推薦）。地黃細(xì)胞外囊泡工程化外泌體研究工具標(biāo)準(zhǔn)化套裝，涵蓋提取到檢測(cè)全流程，提升實(shí)驗(yàn)效率。

相信大家一直都被一個(gè)問題困擾，什么樣的外泌體才是好的外泌體呢？采購(gòu)?fù)饷隗w時(shí)，如何判斷外泌體質(zhì)量？現(xiàn)在，我們對(duì)外泌體供應(yīng)商-維思克思的外泌體WSR0014-1進(jìn)行測(cè)評(píng)。咱們來看看高質(zhì)量的外泌體到底長(zhǎng)什么樣？一、首先對(duì)外泌體進(jìn)行鑒定。首先要證明是外泌體，那如何證明呢？一般從三大基礎(chǔ)表征維度進(jìn)行分析：形態(tài)、粒徑分布、外泌體標(biāo)志蛋白。二、確定外泌體顆粒數(shù)與純度。還需另一重要表征維度外泌體的純度。在做實(shí)驗(yàn)時(shí)，怎樣考察純度呢？不同來源的外泌體，因獲取樣本的不一致，每種樣本中雜蛋白的含量不盡相同，同時(shí)分離方法也不一定相同，這可能導(dǎo)致不一致的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。外泌體純度表征可以用顆粒數(shù)/蛋白、顆粒數(shù)/RNA、蛋白/脂質(zhì)、脂質(zhì)/RNA等多個(gè)維度來評(píng)估外泌體純度，避免mian單一方法的局限性。備注：脂質(zhì)濃度用維思克思WSR0028-2測(cè)量；RNA濃度用維思克思WSR0039測(cè)量。三、評(píng)估外泌體的**性。如果用來做細(xì)胞或動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，外泌體中含有影響細(xì)胞或動(dòng)物的成分，實(shí)驗(yàn)的結(jié)果將會(huì)令人非常詛喪。這次測(cè)評(píng)將外泌體的**性指標(biāo)進(jìn)行的評(píng)估，包括內(nèi)外源病毒、細(xì)菌、支原體的檢測(cè)，結(jié)果顯示**性指標(biāo)全部合格。

外泌體表征與定量難在什么地方？又該怎么做？我們拜訪過很多外泌體研究工作者，其中談到多的是外泌體難以分離，分離后的外泌體不好定量，定量的外泌體數(shù)據(jù)是否準(zhǔn)確等問題。03如何表征考慮到外泌體中其他雜質(zhì)對(duì)定量檢測(cè)的影響，建議先進(jìn)行外泌體純度表征，確保外泌體純度在合理范圍內(nèi)，再進(jìn)行外泌體定量。外泌體純度表征可以用顆粒數(shù)/總蛋白、總蛋白/總脂質(zhì)、顆粒數(shù)/總脂質(zhì)、顆粒數(shù)/總核酸、總蛋白/總核酸等，從多個(gè)維度來評(píng)估外泌體純度。04如何定量外泌體發(fā)揮功能與其所載貨物相關(guān)，對(duì)外泌體定量可以考慮檢測(cè)外泌體中某些分子來評(píng)估。如某些蛋白標(biāo)志、脂質(zhì)、核酸、糖類等分子。針對(duì)外泌體表征與定量此類問題，維思克思不斷嘗試，經(jīng)多次驗(yàn)證終推出了外泌體表征與定量一系列產(chǎn)品。具體產(chǎn)品包括：BCA蛋白定量試劑盒、外泌體脂質(zhì)定量試劑盒、外泌體核酸定量試劑盒、外泌體檢測(cè)抗體、外泌體RNAQC試劑盒、外泌體RNA定量試劑盒。外泌體研究工具標(biāo)準(zhǔn)化操作流程，新手也能快速上手，降低培訓(xùn)成本。

外泌體RNA定量試劑盒外泌體的組成復(fù)雜，不僅包含脂質(zhì)和蛋白質(zhì)，RNA也是其組成部分。從目前文獻(xiàn)報(bào)道統(tǒng)計(jì)結(jié)果來看，RNA是外泌體發(fā)揮功能的主要物質(zhì)。研究外泌體RNA組成和含量具有重要意義。從原理上來說，既然蛋白濃度可以一直作為外泌體定量和表征的重要指標(biāo)。那么用RNA來對(duì)外泌體進(jìn)行定量和表征也是非?？尚械?。外泌體中包含RNA分子，其在細(xì)胞通訊、疾病發(fā)展等方面具有重要的研究和應(yīng)用價(jià)值。但目前外泌體缺乏有效的定量和表征方法，單一的檢測(cè)技術(shù)都有其局限性。WSR0039不需提取外泌體RNA，直接檢測(cè)微量RNA含量。具有操作簡(jiǎn)便，靈敏度高，線性范圍廣，易于檢測(cè)等特點(diǎn)。該試劑盒的檢測(cè)線性范圍是0-25ng，比較低檢測(cè)限可至0.2ng。應(yīng)用范圍：外泌體RNA定量、外泌體表征產(chǎn)品信息：ExosomalRNAQuantificationKit(Fluorometric)（WSR0039）。外泌體研究工具自動(dòng)化數(shù)據(jù)分析兼容，適配主流軟件，提升分析效率。臍帶sEVs技術(shù)服務(wù)

外泌體研究工具小劑量包裝設(shè)計(jì)，適合少量多次實(shí)驗(yàn)，減少試劑浪費(fèi)。檸檬EVs細(xì)胞實(shí)驗(yàn)

外泌體表征系列產(chǎn)品線目前外泌體缺乏有效的定量和表征方法，單一的檢測(cè)技術(shù)都有其局限性。維思克思全新系列產(chǎn)品—外泌體表征與定量試劑盒，該系列產(chǎn)品可對(duì)現(xiàn)有單一表征與定量方法進(jìn)行補(bǔ)充，通過多維度對(duì)分離出的外泌體進(jìn)行評(píng)估，使實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)更加科學(xué)、準(zhǔn)確。01BCA蛋白定量試劑盒（WSR0022），具有靈敏度高、顯色速度快、線性范圍廣的優(yōu)勢(shì)，可高效快速實(shí)現(xiàn)蛋白定量。02脂質(zhì)定量試劑盒(WSR0028/WSR0028-2)，現(xiàn)有的脂質(zhì)定量方法大都需要昂貴的儀器，本產(chǎn)品可代替大型儀器，實(shí)現(xiàn)小成本快速檢測(cè)，具有靈敏度高、操作簡(jiǎn)便、線性范圍廣等優(yōu)勢(shì)。03外泌體RNAQC試劑盒（WSR0013-1），經(jīng)大量研究分析，篩選出2個(gè)陽性外泌體RNA靶標(biāo)和1個(gè)陰性靶標(biāo)，用于表征RNA質(zhì)量。04外泌體蛋白標(biāo)志物鑒定試劑盒（WSR0030），針對(duì)外泌體標(biāo)志蛋白CD9、CD81、TSG101、Calnexin檢測(cè)而研發(fā)的一款方便高效的試劑盒產(chǎn)品，可監(jiān)測(cè)實(shí)驗(yàn)體系并準(zhǔn)確檢測(cè)到外泌體中的以上蛋白。05外泌體RNA定量試劑盒（WSR0039），檢測(cè)線性范圍是0-25ng，比較低檢測(cè)限可至0.2ng，靈敏度高。檸檬EVs細(xì)胞實(shí)驗(yàn)

維思克思生物科技(武漢)有限公司是一家有著先進(jìn)的發(fā)展理念，先進(jìn)的管理經(jīng)驗(yàn)，在發(fā)展過程中不斷完善自己，要求自己，不斷創(chuàng)新，時(shí)刻準(zhǔn)備著迎接更多挑戰(zhàn)的活力公司，在湖北省等地區(qū)的機(jī)械及行業(yè)設(shè)備中匯聚了大量的人脈以及客戶資源，在業(yè)界也收獲了很多良好的評(píng)價(jià)，這些都源自于自身的努力和大家共同進(jìn)步的結(jié)果，這些評(píng)價(jià)對(duì)我們而言是**好的前進(jìn)動(dòng)力，也促使我們?cè)谝院蟮牡缆飞媳３謯^發(fā)圖強(qiáng)、一往無前的進(jìn)取創(chuàng)新精神，努力把公司發(fā)展戰(zhàn)略推向一個(gè)新高度，在全體員工共同努力之下，全力拼搏將共同維思克思生物科技供應(yīng)和您一起攜手走向更好的未來，創(chuàng)造更有價(jià)值的產(chǎn)品，我們將以更好的狀態(tài)，更認(rèn)真的態(tài)度，更飽滿的精力去創(chuàng)造，去拼搏，去努力，讓我們一起更好更快的成長(zhǎng)！